Bar+CP4EPSPS基因轉(zhuǎn)化紫花苜蓿的研究及抗性鑒定
作者：王英哲; 王一楠; 任偉; 徐安凱; 劉艷芝; 郝東云 吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究所; 吉林長春130033
摘要：為了提高苜蓿抗除草劑的能力,以'公農(nóng)1號'紫花苜蓿為試驗材料,采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法將Bar基因和CP4EPSPS基因轉(zhuǎn)入紫花苜蓿中,研究了優(yōu)化影響轉(zhuǎn)化的5個主要因子(分別為外植體、農(nóng)桿菌種類、侵染濃度、共培養(yǎng)時間、篩選濃度),建立了農(nóng)桿菌介導(dǎo)的'公農(nóng)1號'紫花苜蓿高效轉(zhuǎn)化體系,獲得轉(zhuǎn)基因植株。結(jié)果表明:選擇再生苗葉片作為外植體、EHA105農(nóng)桿菌侵染、菌液濃度OD600值為0.8、共培養(yǎng)3 d、轉(zhuǎn)化過程中草銨膦篩選濃度選擇2 mg·L-1為宜,是最佳轉(zhuǎn)化方案。試驗結(jié)合分子檢測和試紙條檢測初步證明目的基因已經(jīng)整合到紫花苜蓿中,最終噴施草甘膦確定12株為轉(zhuǎn)基因植株。
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北方園藝雜志
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