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基于喜樹堿生物合成的喜樹內(nèi)生菌及其關(guān)鍵酶基因克隆

作者：萬(wàn)如意; 高琳; 蘇瑩瑩; 叢云寒; 姜逸; 金朝霞 大連工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院; 遼寧大連116034

摘要：以喜樹內(nèi)生菌為研究對(duì)象,經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)后提取喜樹堿及其衍生物,采用HPLC法對(duì)發(fā)酵液中喜樹堿及其衍生物進(jìn)行定性檢測(cè),獲得能夠產(chǎn)生喜樹堿(CPT)及10-羥基喜樹堿(HCPT)的喜樹內(nèi)生菌。通過對(duì)喜樹堿生物合成途徑的研究,選取10-羥基香葉醇羥化酶(G10H)、10-羥基香葉醇脫氫酶(HGO)、色氨酸脫羧酶(TDC)和異胡豆苷合酶(STR)4個(gè)關(guān)鍵酶基因作為研究對(duì)象,設(shè)計(jì)特異性引物,克隆目的基因。提取喜樹RNA,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成cDNA,同時(shí)提取喜樹內(nèi)生菌DNA。分別以植物cDNA和內(nèi)生菌DNA作為模板,篩選鑒定喜樹堿合成途徑的關(guān)鍵酶基因G10H、HGO、TDC和STR并與喜樹關(guān)鍵酶基因進(jìn)行比較,初步解析喜樹堿代謝途徑,為喜樹內(nèi)生菌發(fā)酵合成喜樹堿及其衍生物提供理論依據(jù)。

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大連工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)雜志

大連工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)雜志， 雙月刊，本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向，堅(jiān)持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進(jìn)性、創(chuàng)新性，刊載內(nèi)容涉及的欄目：食品與生物工程、紡織與材料工程、機(jī)械工程與自動(dòng)化、信息科學(xué)與技術(shù)等。于1981年經(jīng)新聞總署批準(zhǔn)的正規(guī)刊物。

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