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巢式PCR早期檢測實(shí)驗大鼠卡氏肺孢子蟲

作者:張小娟; 楊芳芳; 歐陽頤; 王鴿; 黎學(xué)銘; 林睿 廣西醫(yī)科大學(xué)病原生物學(xué)教研室; 南寧530021; 廣西疾病預(yù)防控制中心; 南寧530028

摘要:目的探討ITS1-5.8S rRNA—ITS2巢式PCR法檢測大鼠卡氏肺孢子蟲的敏感性及早期檢測的評估。方法采用地塞米松免疫抑制法誘導(dǎo)大鼠感染肺孢子蟲,大鼠分為7組,6組實(shí)驗組和1組對照組,每組10只,實(shí)驗組采用地塞米松免疫抑制法誘導(dǎo)大鼠感染肺孢子蟲,對照組則不予激素處理。自誘導(dǎo)開始第3周至第8周每周收集1組實(shí)驗組大鼠肺組織(1ungtissue,LT)和支氣管肺泡灌洗液(bronchoal veolar lavage fluid,BALF)標(biāo)本,采用ITSl-5.8SrRNA—ITS2巢式PCR法擴(kuò)增卡氏肺孢子蟲ITSI-5.8SrRNA—ITS2,同時采用六亞甲基四胺銀(GMS)染色鏡檢法對第3周到第8周的大鼠肺組織和肺泡灌洗液標(biāo)本進(jìn)行檢測,并將兩種方法進(jìn)行比較以評估巢式PCR技術(shù)的敏感性。結(jié)果采用ITSI-5,8SrRNA—ITS2巢式PCR法對實(shí)驗感染卡氏肺孢子蟲的大鼠¨和BALF進(jìn)行檢測,卡氏肺孢子蟲DNA陽性率依次為第3周20%(2/10)、0(0/10),第4周70%(7/10)、10%(1/10),第5周90%(9/10)、30%(3/10),第6周90%(9/10)、80%(8/10),第7周100%(10/10)、80%(8/10),第8周63%(5/8)、63%(5/8)。而GMS染色鏡檢法僅于第5周開始檢出卡氏肺孢子蟲包囊,第6、7周包囊數(shù)最多。實(shí)驗組大鼠誘導(dǎo)后的前4周無明顯卡氏肺孢子蟲肺炎體征,第5周后癥狀趨于明顯。結(jié)論ITSI-5.8SrRNA-ITS2巢式PCR法敏感性高,可在第3周后和無癥狀階段實(shí)驗大鼠中檢出卡氏肺孢子蟲,并且比鏡檢法早兩周。

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國際醫(yī)學(xué)寄生蟲病雜志

國際醫(yī)學(xué)寄生蟲病雜志, 雙月刊,本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向,堅持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進(jìn)性、創(chuàng)新性,刊載內(nèi)容涉及的欄目:述評、論著、特約綜述、綜述、現(xiàn)場研究、疾病控制、病例報道、學(xué)術(shù)爭鳴、國外學(xué)者專欄、學(xué)術(shù)會議動態(tài)、年度學(xué)科進(jìn)展、標(biāo)準(zhǔn)與指南、讀者作者編者等。于1973年經(jīng)新聞總署批準(zhǔn)的正規(guī)刊物。

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