家雞GPR15基因的克隆、功能探究及組織表達(dá)分析
摘要：孤兒受體G蛋白偶聯(lián)受體15(GPR15)在哺乳動(dòng)物腸道穩(wěn)態(tài)以及炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要生理效應(yīng),但在非哺乳動(dòng)物中,針對(duì)GPR15的研究幾屬空白。本文以家雞Gallus gallus domesticus為模型,首次克隆了GPR15基因,并對(duì)其功能與組織表達(dá)進(jìn)行了探究。結(jié)果顯示:家雞GPR15編碼區(qū)cDNA長(zhǎng)度為1 107 bp,由1個(gè)外顯子組成,可編碼368個(gè)氨基酸的受體蛋白。序列分析表明家雞GPR15是具有7次跨膜結(jié)構(gòu)的G蛋白偶聯(lián)受體,且家雞GPR15與人Homo sapiens、北美綠蜥蜴Anolis carolinensis、小鼠Mus musculus的GPR15具有約56%的氨基酸序列一致性;雖然系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明GPR15與愛(ài)帕琳肽受體(APLNR)有較近的進(jìn)化關(guān)系,但在表達(dá)家雞GPR15的HEK293細(xì)胞中,APLNR的內(nèi)源性配體Apelin和Apela不能激活家雞GPR15;此外,實(shí)時(shí)定量PCR分析發(fā)現(xiàn)GPR15在家雞脾臟中高表達(dá),在盲腸、肺中有中等水平表達(dá),而在其他組織中微弱表達(dá)。上述結(jié)果為探究GPR15在禽類中的生理功能奠定了基礎(chǔ)。
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