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一株湖北HP-PRRSV分離株nsp2基因遺傳變異分析

作者:陳盛楠; 陳奎蓉; 趙雯娟; 楊永磊; 趙一蘋(píng); 曹素芳 河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)院; 河南鄭州450046

摘要:為了解湖北地區(qū)豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)的遺傳變異情況和分子流行病學(xué)情況,從湖北地區(qū)某豬場(chǎng)采集疑似病料進(jìn)行處理,接種Marc-145細(xì)胞,待細(xì)胞發(fā)生病變后收獲病毒,提取病毒總RNA,應(yīng)用RT-PCR法對(duì)PRRSV nsp2部分基因進(jìn)行擴(kuò)增,經(jīng)序列測(cè)定,并與美洲株VR-2332、歐洲株Lelystad virus及國(guó)內(nèi)各PRRSV分離株進(jìn)行核苷酸及其推導(dǎo)的氨基酸進(jìn)行同源性比較,并繪制系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)。結(jié)果表明,經(jīng)RT-PCR擴(kuò)增獲得了PRRSV湖北分離株(命名為HDZZ1)的nsp2基因,核苷酸序列分析顯示,獲得的nsp2核苷酸與VR-2332的同源性為77.7%,與Lelystad virus的同源性為44.3%。其氨基酸與VR-2332的同源性為64.58%,與Lelystad virus的同源性為13.93%。證明所獲得PRRSV仍為美洲型。與我國(guó)分離的高致病性PRRSV毒株07BJ、BJ0708、GD、GDYC、HEB1、Henan-1、 HN- HW、HPBEDV、HUB1、HUN4、JXA1、SX-1、SX2009核苷酸同源性高達(dá)97.3%~98.8%,氨基酸同源性為 96.40%~ 98.8%,氨基酸序列分析結(jié)果顯示,Nsp2蛋白在222位和274-302位兩處出現(xiàn)了30個(gè)氨基酸的不連續(xù)缺失,其N(xiāo)sp2蛋白的抗原表位發(fā)生了改變。系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)結(jié)果表明, HDZZ1株與高致病性PRRSV毒株位于同一大分支中,與歐洲代表株(Lv)、美國(guó)NADC30株和國(guó)內(nèi)NADC30-likeHNjz15株處于不同分支中。由此斷定,HDZZ1毒株為高致病性PRRSV毒株。

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現(xiàn)代牧業(yè)雜志, 季刊,本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向,堅(jiān)持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進(jìn)性、創(chuàng)新性,刊載內(nèi)容涉及的欄目:試驗(yàn)研究、綜述與專(zhuān)論、經(jīng)驗(yàn)交流等等。于1981年經(jīng)新聞總署批準(zhǔn)的正規(guī)刊物。

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