摘要:目的:探討在TNFa誘導(dǎo)的腦皮層神經(jīng)細(xì)胞損傷機(jī)制中神經(jīng)鈣調(diào)蛋白的作用。方法:用TNFn誘導(dǎo)原代培養(yǎng)的胎鼠皮層神經(jīng)細(xì)胞損傷;通過(guò)MTT法、LDH釋放率測(cè)定觀察細(xì)胞生存力和損傷程度;通過(guò)膜聯(lián)蛋白(Annexinv)和碘化丙啶(PI)免疫熒光法觀察細(xì)胞凋亡或壞死程度。結(jié)果:MTT和LDH釋放率測(cè)定結(jié)果表明.TNFa可引起神經(jīng)細(xì)胞的生存力明顯下降,并呈量艘、時(shí)效依賴關(guān)系。TNFd與CsA聯(lián)合應(yīng)用組,皮層神經(jīng)元的生存力則提高不明顯,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AnnexinV和PI免疫熒光檢測(cè)表明,CsA不能減輕TNFa誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞的凋亡和壞死。結(jié)論:神經(jīng)鈣調(diào)蛋白途徑在TNFa引起皮質(zhì)神經(jīng)元損傷并不起主要作用。說(shuō)明TNFa可通過(guò)非神經(jīng)鈣調(diào)蛋白途徑引起神經(jīng)元損傷。
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