單增李斯特菌llsB基因克隆及序列分析
摘要：試驗(yàn)旨在對(duì)新疆綿羊腦炎臨床分離株LM90SB2單增李斯特菌llsB基因進(jìn)行克隆及生物信息學(xué)分析,以期進(jìn)一步完善單增李斯特菌溶血素S的功能研究。根據(jù)GenBank中單增李斯特菌F2365基因全長(zhǎng)序列(登錄號(hào)為:AE017262)設(shè)計(jì)其特異性引物,利用PCR方法對(duì)新疆分離株LM90SB2的llsB基因進(jìn)行擴(kuò)增,回收目的基因與pMD19-T載體連接,采用PCR、雙酶切鑒定篩選陽(yáng)性菌并進(jìn)行測(cè)序,對(duì)所獲序列進(jìn)行同源性比對(duì)及遺傳變異分析。結(jié)果顯示,新疆分離株LM90SB2的llsB基因序列全長(zhǎng)為876 bp,共編碼291個(gè)氨基酸;LM90SB2分離株llsB基因核苷酸序列與10-0809、81-0592、81-0558、02-1792、NTSN、02-1289不同分離株同源性均為100%,與CIIMS-PH-1、NRRLB-57603株的同源性均為99.9%,與J1816、R2-502株的同源性為44.7%~45.0%。分子進(jìn)化樹(shù)顯示,LM90SB2菌株llsB基因與血清型為4b的菌株親緣關(guān)系較近,聚類(lèi)為同一分支。蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)表明,LM90SB2 llsB蛋白為親水性蛋白,無(wú)信號(hào)肽,不形成跨膜結(jié)構(gòu)。本試驗(yàn)成功克隆了LM90SB2株llsB基因,為深入探討該基因功能提供全面的理論依據(jù)。
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中國(guó)畜牧獸醫(yī)雜志
中國(guó)畜牧獸醫(yī)雜志， 月刊，本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向，堅(jiān)持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進(jìn)性、創(chuàng)新性，刊載內(nèi)容涉及的欄目：生物技術(shù)、生理生化、動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)、遺傳繁育、預(yù)防獸醫(yī)、基礎(chǔ)獸醫(yī)等。于1974年經(jīng)新聞總署批準(zhǔn)的正規(guī)刊物。
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