沉默HIF-1α基因?qū)87細胞增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移能力的影響
摘要：目的觀察沉默低氧誘導因子1α（HIF-1α）基因后對膠質(zhì)母細胞瘤U87細胞增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移能力的影響。方法實驗分3組，干擾組（轉(zhuǎn)染表達HIF-1α-shRNA的質(zhì)粒）、對照干擾組件（轉(zhuǎn)染陰性對照shRNA序列）及未處理組。干擾組利用前期構(gòu)建的HIF—1α基因的短發(fā)夾RNA（shRNA）沉默HIF-1α基因，構(gòu)建HIF-1α-shRNA慢病毒表達載體，存脂質(zhì)體介導下轉(zhuǎn)染人膠質(zhì)母細胞瘤細胞U87。采用RT-PCR和Westernblotting檢測HIF-1α基因干擾效率．MTT法檢測細胞生長增殖能力，遷移實驗檢測細胞的體外遷移能力，Transwell小室模型檢測細胞的體外侵襲及轉(zhuǎn)移能力。結(jié)果RT—PCR和Westernblotting實驗證實，與對照干擾組及未處理組比較，十擾組細胞月HIF-1α mRNA表達水平明顯下降，蛋白條帶明顯減弱。MTT細胞增殖實驗顯示，干擾組細胞增殖水平較其他2組明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P〈0．05）。Transwell小室侵襲實驗中，未處理組、對照干擾組、干擾組穿膜細胞數(shù)分別為（125．2±10．8）個、（118．3±8．3）個、（60．9±5．4）個，差異有統(tǒng)計學意義（P〈0．05）。結(jié)論HIF-1α—shRNA能有效抑制U87細胞株HIF-1α mRNA及蛋白的表達．并能抑制U87細胞的增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移能力。
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