av在线播放日韩亚洲欧,av网站免费线看,bt√天堂资源在线官网,а天堂www在线忘忧草,国产成人精品97

摘要：目的:摸索人源瞬時受體電位M2型通道(TRPM2)羧基端Nudix水解酶9(NUDT9)同源結(jié)構(gòu)域(NUDT9-H)的蛋白提取和純化方法。方法:異丙基硫代半乳糖苷誘導(dǎo)表達(dá)的Rosetta(DE3)大腸埃希菌菌株經(jīng)超聲破碎和離心后,將收集到的上清液與GST磁珠結(jié)合并用還原型谷胱甘肽洗脫以抽提GST-NUDT9-H融合蛋白,濃縮離心后再經(jīng)分子排阻色譜層析純化,最后經(jīng)凝血酶酶切并與GST磁珠結(jié)合即得NUDT9-H蛋白。結(jié)果:含有0.5%的十二烷基-β-D-麥芽糖苷(DDM)裂解溶液體系和0.025%的DDM分子排阻層析色譜溶液體系能夠提高GST-NUDT9-H融合蛋白的穩(wěn)定性,再按每2mg融合蛋白加入1U凝血酶切割24h,即獲得高純度NUDT9-H蛋白。結(jié)論:NUDT9-H蛋白穩(wěn)定性較差,提取和純化體系中需添加DDM以穩(wěn)定其構(gòu)象從而提高目的蛋白的產(chǎn)量和純度。